冬虫夏草提取物可减轻小鼠间质性肺炎的病理损伤；miR-21-5p可能通过负向调控PTEN激活PI3K/Akt信号通路能抑制Ⅱ型肺泡上皮细胞凋亡而减轻高氧性急性肺损伤

发布时间：2023-05-17 05:50:37
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肺泡是肺部气体交换的主要部位，也是肺的功能单位。

 

肺泡由小肺泡细胞和大肺泡细胞组成。

小肺泡细胞，又称I型肺泡细胞，厚约0.1微米，基底部是基底膜，无增殖能力。

大肺泡细胞，又称Ⅱ型肺泡细胞或Ⅱ型肺泡上皮细胞，分泌表面活性物质（二棕榈酰卵磷脂），以降低肺泡表面张力。

I型肺泡细胞覆盖了肺泡95%的表面积，是进行气体交换的部位。电镜下，胞质中可见较多小泡，内有细胞吞入的微小粉尘和表面活性物质，细胞能将他们转运至间质内清除。II型肺泡细胞在肺内具有重要功能：调节表皮活性物质代谢、肺泡环境的维持、肺损伤时向I型上皮的转化等等。I型肺泡细胞无增殖能力，损伤后由Ⅱ型肺泡细胞增殖分化补充。因而Ⅱ型肺泡细胞更具研究价值。所以要研究肺部疾病一般都离不开对II型肺泡细胞的相关研究。

 

       近期就有来自于遵义医科大学的科研学者们（冯帮海 梅鸿 刘鑫鑫 刘君亚 余琨 覃松 刘国跃 陈淼等）做了一项研究，他们研究了微小RNA-21-5p(miR-21-5p)是否通过激活磷脂酰肌醇3激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)信号通路调控Ⅱ型肺泡上皮细胞(AECⅡ)凋亡减轻高氧性急性肺损伤(HALI)。他们将72只雄性SD大鼠按随机数字表法分为常氧对照组、HALI组、PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002+HALI组(LY+HALI组)、miR-21-5p过表达+LY294002+HALI组(miR-21-5p+LY+HALI组)、miR-21-5p过表达+HALI组(miR-21-5p+HALI组)及二甲基亚砜(DMSO)+HALI组,每组12只。用95%氧气制备HALI动物模型;常氧对照组动物在常氧状态下正常饲养。制模前3周经气管导管滴入200μL滴度(1×1012TU/mL)的miR-21-5p腺相关病毒载体AAV6-miR-21-5p转染肺组织;DMSO及LY294002均以0.3 mg/kg于制模前1 h经尾静脉给药。制模后48 h,取颈动脉血检测氧合指数(OI)及呼吸指数(RI),采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测miR-21-5p表达;取肺组织,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测炎症因子〔肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素(IL-6、IL-1β)〕水平,测定肺湿/干质量(W/D)比值,苏木素-伊红(HE)染色后光镜下观察肺组织病理学改变并进行病理学评分。每组取6只大鼠提纯AECⅡ细胞,应用流式细胞仪检测凋亡率,采用蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)和PI3K/Akt信号通路蛋白的表达水平。结果与常氧对照组比较,高氧暴露后可见肺泡间隔增厚,大量炎症细胞浸润,RI、炎症因子、肺W/D比值、病理学评分,以及AECⅡ细胞早期凋亡率、PTEN蛋白表达和Akt磷酸化水平均升高,而OI及miR-21-5p表达降低,说明模型制备成功。LY294002预处理后,可进一步加重HALI大鼠肺组织病理损伤,RI、炎症因子、肺W/D比值均较HALI组进一步升高,OI进一步降低,同时可促进AECⅡ细胞凋亡,进一步上调PTEN蛋白表达,并抑制Akt磷酸化;而miR-21-5p预处理可负向调控PTEN,激活PI3K/Akt信号通路,抑制AECⅡ细胞凋亡,减轻HALI,与LY+HALI组比较,炎症因子水平降低〔TNF-α(μg/L):100.33±3.48比116.55±2.53,IL-6(ng/L):141.06±3.70比161.31±3.59,IL-1β(μg/L):90.82±3.69比112.23±2.87,均P<0.05〕,RI、肺损伤病理学评分、肺W/D比值及AECⅡ细胞早期凋亡率明显降低〔RI:0.81±0.02比1.05±0.07,病理学评分(分):0.304±0.008比0.359±0.007,肺W/D比值:5.29±0.03比5.52±0.08,细胞凋亡率:(27.20±2.34)%比(34.17±1.49)%,均P<0.05〕,OI、miR-21-5p表达均明显升高〔OI(mmHg,1 mmHg≈0.133 kPa):266.71±2.75比230.12±4.04,miR-21-5p(2-ΔΔCt ):2.21±0.13比0.33±0.03,均P<0.05〕,且AECⅡ细胞PTEN蛋白表达显着降低(PTEN/GAPDH:0.50±0.06比0.93±0.06,P<0.05),Akt磷酸化明显增加〔磷酸化Akt(p-Akt)蛋白(p-Akt/GAPDH):0.86±0.05比0.56±0.06,P<0.05〕。他们得出结论：miR-21-5p可能通过负向调控PTEN激活PI3K/Akt信号通路,从而抑制AECⅡ细胞凋亡,减轻HALI。并发表于：《中华危重病急救医学》 箱 北大核心  2023年第2期140-145,共6页，http://qikan.cqvip.com/Qikan/Article/Detail?id=7109340175

        另有来自于焦作煤业（集团）有限责任公司中央医院呼吸与危重症医学科二区的（邢双丽 赵明娟 金荣）的研究，他们冬虫夏草提取物(CSE)介导哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1(mTORC1)/转录因子EB(TFEB)通路对间质性肺炎小鼠肺泡上皮细胞自噬的作用。他们将75只C57BL/6雄性小鼠,随机选择15只作为正常组,另外60只用一次性鼻腔滴注博来霉素诱导间质性肺炎模型,后随机分为模型组、CSE低剂量组(20 mg·kg-1·d-1)、CSE中剂量组(40 mg·kg-1·d-1)和CSE高剂量组(80 mg·kg-1·d-1),每组各15只,正常组和模型组灌服等量生理盐水,连续28 d。检测肺组织湿干质量比(W/D);检测肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素6(IL-6)、白介素1β(IL-1β)水平;染色观察各组小鼠肺脏组织形态及纤维化情况;检测肺组织细胞凋亡水平;检测Ⅱ型肺泡上皮细胞中mTORC1、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1(p-mTORC1)、TFEB、p62、自噬微管相关蛋白轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)、自噬微管相关蛋白轻链3Ⅰ(LC3Ⅰ)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组小鼠肺脏水肿,W/D值显著提高(P<0.05);肺组织结构不完整,炎性渗出较多、胶原纤维严重沉积并见有大量细胞凋亡,肺灌洗液中TNF-α、IL-6、IL-1β水平及Ⅱ型肺泡上皮细胞中p-mTORC1、p62、α-SMA蛋白表达水平显著升高,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ及TFEB蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与模型组比较,CSE低、中和高剂量组小鼠间质性肺炎病理症状得到显著改善,TNF-α、IL-6和IL-1β水平及Ⅱ型肺泡上皮细胞中p-mTORC1、p62和α-SMA显著降低,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ及TFEB蛋白表达水平显著升高(P<0.05),且表现出剂量依赖性。结论CSE可减轻小鼠间质性肺炎的病理损伤,降低细胞凋亡及促炎因子的表达,改善肺脏组织纤维化,其机制可能与抑制mTORC1活性、促使TFEB参与肺泡上皮细胞自噬的发生有关。并发表于《西北药学杂志》 CAS  2023年第1期72-77,共6页，

http://qikan.cqvip.com/Qikan/Article/Detail?id=7108645200

 

 

 

 

 

 

 

小编心声：希望广大科研学者加大研究力度，早日让全人类都远离病痛！

武汉赛奥斯为科研助力：

PC-002h         人Ⅱ型肺泡上皮细胞（hPAEpiC）

PC-004shp    绵羊Ⅱ型肺泡上皮细胞（PAEpiC）

PC-002pig        猪Ⅱ型肺泡上皮细胞（PAEpiC）

PC-004rab        兔Ⅱ型肺泡上皮细胞（PAEpiC）

PC-003m       小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞（PAEpiC）

PC-004r         大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞（PAEpiC）